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结构生物学技术效劳
结构生物学技术效劳

卵白质结晶是将庞大的大分子形成结构化、有序晶格的行为和要领,同时也是支持卵白质结构研究的cq9电子步。卵白分子结晶对情况及条件具有苛刻的要求,优秀的结晶筛选历程是获得良好卵白晶体的前提,有助于卵白质晶体学的研究事情,进行更好地药物化学研究;增进开发卵白质类药物、扩大生产规模、优化生产历程。
单晶培养
晶体培养中常会用到如:溶剂挥发法,冷却结晶法,蒸汽扩散法,液-液扩散法,升华法,共晶生成法等多种方法,也需要对晶体培养的种种组合参数进行调解,我们的团队拥有高水准的晶体生长实验技巧和富厚的单晶培养经验,能够凭据药物分子的物理化学性质制定最适合的结晶计划。
  • Native重组卵白晶体制备
    适用于拥有已知同源卵白结构的样本。
    其氨基酸序列与同源卵白具有相似的折叠方法,可以以已有的 同源卵白晶体结构为模型,进行分子置换获取目标卵白结构的 相位信息,进而解析获得目标卵白的晶体结构。此类卵白通常 接纳通例晶体培养要领。
  • 含有重原子晶体制备
    常用于缺乏已知同源卵白结构的样品。
    天然卵白的晶体衍射数据中不包括相位信息。在没有同源卵白 结构模型进行分子置换的情况下,可培养包括有重原子的卵白 晶体,凭据晶体中重原子的变态散射信号解析获得相位信息, 进而解析获得目标卵白的晶体结构。
共晶制备
共晶即卵白质与其他生物分子(即配体,如核酸、酶、小分子及其他卵白分子等)的复合物形成晶体,通过研究“卵白-配体”的共晶结构来研究其口袋区域,关于理解卵白质功效、药物设计、剖析生物分子互作机理等研究具有重要意义。在小分子药物的开发,抗原抗体复合物、PROTAC、酶的催化机理的研究等其他领域,都需要对共晶结构进行研究。共晶的制备难度要远高于单卵白晶体的制备难度,cq9电子团队除开通例共结晶要领,还拥有成熟的MicroED技术,突破复合物共结晶尺寸不敷无法进行解析的瓶颈,只需纳米级别的晶体即可获取解析数据,获得完整结构。
  • 共结晶法
    适用于研究普通“卵白质-配体”复合物。使目的卵白与配体结合形成复合物(如抗原-抗体复合物),复合物抵达一定过饱和状态后,会以晶体的形态析出。
    通例的共晶制备手段有:分批结晶法、液-液扩散法、蒸汽扩散法(悬滴法、坐滴法)等。
  • 浸泡法
    一种基于卵白质与其小分子配体作用机理的结晶要领。
    将卵白质浸泡在小分子配体溶液中,配体扩散到结合位点,从而获得共晶晶体。使用晶体学手段来对此类共晶结构进行研究,可获取卵白与小分子作用机制及结构变革,剖析其分子交互原理。

结晶初筛
在初筛阶段,我们通常接纳高通量筛选的方法来获取差别结晶条件组合下的高纯度卵白结晶,并通事后续其他技术手段视察其结晶状况推测更优的结晶条件。在这一历程中,需要调解庞大的化学和物理参数,包括温度, pH, 溶剂的介电常数,溶液中的盐,以及稳定剂的保存和浓度等。
我们拥有数十种结晶试剂盒组合和近两千种结晶筛选条件,在初筛阶段实现高通量的筛选模式;应用高效率的结晶机械人,不但大大缩短实验时间,并且单个结晶初筛条件的样品用量可降低至0.1μL,减少样品损耗,降低实验本钱。
结晶优化
晶体样本的尺寸和质量会直接影响后续的结构研究,因此在初筛的基础上,我们会对卵白结晶的条件进行进一步优化,对结晶参数进行微调,调解晶体的结晶质量、固体形态,以获取对后续结构研究最优的结果。
结晶优化中需要调解的参数种类通常与结晶初筛历程相似,我们通过改变沉淀剂、盐组分、pH,溶剂的介电常数,温度等条件,进一步优化您的晶体样本。在难以形成良好晶体的样本或您对结晶历程有特殊需求时,我们会接纳一些特殊的途径和技术,如加入去污剂、多种类添加剂或Seeding的方法以增强成核和晶体生长。
卵白晶体鉴定
获得卵白晶体类似物之后,适外地鉴别卵白晶体或是盐晶,可以减少卵白样本消耗、降低本钱,提高效率,也可以对结晶条件进行进一步优化,从而提高产品质量。我们的结晶实验室配备普通光学显微镜及紫外显微镜,用以对晶体样本进行鉴定和筛选。

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