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卵白表达技术效劳
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KRAS G12D

  • 配景
    KRAS是一种膜结合GTP酶,被认为是 GDP-GTP 调理的开关。RAS家族(KRAS、NRAS、HRAS)是人类癌症中最常见的致癌原因之一,KRAS基因突变占RAS基因突变总数的86%。2021年安进(AMGEN)获FDA加速批准的KRAS G12C抑制剂Lumakras(sotorasib)上市。

    KRAS的突变众多,除G12C外,常见的另有G12D,G12V,G12A和G12S等。KRAS G12D在胰腺癌和结直肠癌中的突变率很高。海内外众多药企也在进行KRAS G12D抑制剂的研发。
  • 实验结果
    KRAS 与GTP结适时,处于激活状态;与 GDP 结适时,处于“关闭”状态,通过这种状态的转换来调理细胞质信号网络并控制种种正常的细胞历程。

    GTP转化为GDP是一个极快速的历程,Kras与GTP结合形成的激活状态很难获得。

    我们表达纯化出了处于“关闭“状态的KRAS G12D卵白(图一)。
    图一 KRAS-GDP表达纯化结果
    用酶降解与KRAS结合的GDP,加入GppCp与KRAS孵育,获得激活状态的KRAS G12D卵白(图二)。
    图二 KRAS-GppCp表达纯化结果
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